白金会员
已认?/p>
同一系统上使?/strong>
Flash和制备HPLC色谱纯化多肽
色谱应用
“/p>
1
简今/strong>
固相多肽合成（SPPS）是科学研究、临床和商业合成领域中最常用的多肽合成路径。由于反应通常产生多种长度的肽链，所以这些反应混合物的提纯非常具有挑战性。使用大孔反相填料色谱柱和制 HPLC 能够得到高纯度的结果，所以常用于此类纯化。不过，多肽反应通常很复杂，含有很多杂质。将此样品引入昂贵的制备 HPLC 柱和系统中会产生额外的消耗，而且需要较多时间进行样品纯化。Pure Prep 系统既能运行制备 HPLC 也能运行 Flash 色谱模式，令您从容选择使用制备 HPLC 还是更经济的 Flash 色谱。FlashPure 大孔 Flash 柱填装高效的 20μm 粒径的填料，分离度高，这是分离很靠近的化合物分子诸如多肽等特别需要的、span style="color: rgb(86, 172, 221); box-sizing: border-box;">在此我们证明，如何在同一系统上使 FlashPure Flash 柱和 HPLC 柱纯化复杂的多肽反应物，并使最终纯度超?5%、/strong>
2
实验材料和方泔/strong>
|
样品 |
样品1（Flash色谱（/strong> |
样品2（制备HPLC（/strong> |
|
多肽混合?/p> |
25mg 反应混合?/p> |
15mg 反应混合?/p> |
|
目标多肽链长 |
20 个氨基酸 |
15 个氨基酸 |
|
多肽序列 |
CQQYNRPYXXXGGTKLEIKR-NH2 |
CAKHYYYGGXXXMDY-NH2 |
|
纯化 |
Flash 色谱 |
Prep 色谱 |
|
仪器系统 |
Pure flash 模式 |
Pure Prep 模式 |
|
Flash 柱芯/色谱柰/p> |
FlashPure WP C18 12g |
Vydac 150HC?2×150mm?0um |
|
梯度/检测器 |
A=氳/p> B=乙腈+0.1%TFA |
A=氳/p> B=乙腈+0.1%TFA |
|
进样模式 |
液体进样 |
液体进样 |
|
分析 |
分析 HPLC |
|
系统 |
Agilent 1200 |
|
色谱柰/p> |
Kromasil C18 100×4.6mm?um |
|
流动盷/p> |
A=?0.1%TFA B=20%水，80%乙腈+0.1%TFA |
|
梯度 |
样品1?0分钟?0-50%B 样品2?0分钟?5-55%B |
|
检测波镾/p> |
UV214nm |
|
进样模式 |
液体进样-多种进样体积 |
3
结果与讨讹/strong>
|
纯度结果 |
纯化前纯?/strong> |
纯化后纯?/strong> |
|
样品1（Flash 色谱纯化（/p> |
58.5% |
95% |
|
样品2（Prep 色谱纯化（/p> |
55.9% |
98.9% |
4
结论
通过以上实验证明９span style="color: rgb(86, 172, 221); box-sizing: border-box;">使用反相 Flash 柱和 HPLC 色谱柱，成功地在同一系统上进行了多肽纯化，得到纯度超 95% 的馏分、/strong>高效大孔 Flash 色谱填料提供了堪比制 HPLC 色谱柱水平的纯度，Pure Prep 系统既能够运行制 HPLC 也能运行 Flash 色谱模式，您可以自如选择使用制备 HPLC 或更经济的一次 Flash 色谱柱、/p>
长按上方二维码联系我?/strong>
或拨打联系电话：
400 - 880 - 8720
微信公众叶/strong>
步琦智慧实验宣/span>
淘宝官方旗舰?nbsp;
瑞士步琦
