应用
目的 观察二氧化硅(SiO2)对肺上皮细胞间质转化中E钙黏蛋白(E-cadherin)、?平滑肌激动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,并探讨表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在肺纤维化上皮间质转化中的作?方法 ?0 μg/ml的SiO2粉尘刺激肺泡巨噬细胞(AM?分别作用3??2?8?4?6 h后收集上清液,用ELISA方法检测上清中TGF-β1蛋白的表?并以TGF-β1表达的高峰时间点(T18h)的AM培养上清作为条件培养上清.用终浓度分别?(对照组)?0?0 μg/mlSiO2)?00?00 μg/ml SiO2)?00 μg/ml?00 μg/ml SiO2)的SiO2粉尘与AM条件培养上清液(T18 h)共同刺激肺上皮细?孵育48 h?于倒置显微镜下观察细胞形态学改变,并收集不同时段细?用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测E-cadherin、?SMA、EGFR mRNA表达水平,细胞免疫荧光方法检测E-cadherin、?SMA及EGFR蛋白表达的变?结果 染尘组AM培养上清液中TGF-β1蛋白的表达在各时间点均明显高于对照组,且随作用时间的延长呈先升高后降低的趋?18h时水平最?差异有统计学意义(P?.05?倒置显微镜观察肺上皮细胞经SiO2处理后细胞形态出现间质细胞特?由鹅卵石状转变为纺锤形或梭型,伪足样改?似成纤维细胞,SiO2 200 μg/ml组最明显.随着SiO2浓度的升?E-cadherin mRNA和蛋白表达逐渐下调,?00 μg/ml SiO2组表达最?α-SMA、EGFR mRNA和蛋白表达逐渐上调,200 μg/ml SiO2组?SMA表达最髗50?00?00 μg/ml SiO2组与对照组的差异有统计学意义(P?.05?结论 SiO2体外刺激AM,使TGF-β1蛋白表达水平明显升高,其上清液与SiO2可共同诱导肺上皮细胞向间质细胞转?其机制可能与EGFR信号通路有关....

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2016-01-07

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